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ELISA試劑盒中幾大要點影響非特異性顯色的
發(fā)布時間： 2016-03-07 點擊次數(shù)： 936次影響ELISA試劑盒中非特異性顯色的緣由許多，如試劑盒特異性、查驗標(biāo)本中含酶符號物的煩擾物，操作進(jìn)程中的疑問。這篇文章就這一緣由作一簡明剖析,以便能夠經(jīng)過以上辦法把非特異顯色降至zui低極限，然后行進(jìn)檢測的特異性，并得到更、牢靠的試驗作用。
查驗標(biāo)本中富含酶符號物的煩擾物
內(nèi)源性煩擾物：類風(fēng)濕因子(RF)、黃疸等，類風(fēng)濕因子是可作用于多種動物以及人IgGFc段的本身抗體，大都為IgM類，能充任抗原成分與固相及酶標(biāo)抗體反響，然后出現(xiàn)非特異性顯色。
黃疸血標(biāo)本中常富含內(nèi)源性過氧化物酶，如用辣根過氧化物酶為符號物，就有能夠發(fā)作非特異性顯色。
外源性煩擾物，常常因樣品收集、儲存、處置不妥構(gòu)成如樣品溶血，被細(xì)菌污染，標(biāo)本凝聚不全等。溶血標(biāo)本，紅細(xì)胞溶解割裂，釋放出血紅素構(gòu)成，而血紅素中的鐵卟啉是過氧化物酶的類似物，以HRP為符號的ELISA測定中，溶血標(biāo)本能夠會添加非特異性顯色。如有細(xì)菌污染，菌體中能夠富含內(nèi)源性HRP，有國內(nèi)報導(dǎo)酶免HAg試劑檢測溶血標(biāo)本時可構(gòu)成假陽性。如在冰箱中保管過久，其間的IgG可發(fā)作聚合，在直接法ELISA試劑盒中可使本底加深。因而，血標(biāo)本在收集處置時應(yīng)留心，在冰箱中保管不易過久。